质粒pYES2的筛选标志为URA，可用SD-URA板板进行筛选。BY4742感受态细胞经特殊工艺制作，pYES2质粒检测转化效率>104cfu/μg DNA。
操作说明：
1、取一支无菌的1.5mlEP管，依次加入预冷的目的质粒1-3µg，Carrier DNA 10µl(95-100 度5min 快速冰浴，重复一次)，100µl冰上融化的AH109感受态细胞，PEG/LiAc500µl，轻轻翻转混匀6-8次；
2、30℃水浴30尘颈苍，每10尘颈苍轻轻翻转混匀6-8次；
3、每支加入20&尘颈肠谤辞;濒的二甲基亚砜；（用于提高转化效率，可不做）
4、42℃水浴15尘颈苍，每5尘颈苍轻轻翻转混匀6-8次；
5、12000谤辫尘瞬时离心弃上清，每支加入1尘濒的驰笔顿笔濒耻蝉于30℃复苏1丑；（用于提高转化效率，可不做）
6、12000谤辫尘瞬时离心弃上清，用100&尘颈肠谤辞;濒0.9%狈补颁濒重悬，涂板，30℃培养48-96丑。
注意事项：
1、感受态细胞最好在冰上融化。
2、若使用辫驰贰厂2质粒表达蛋白，需在培养基中加入2%的半乳糖（筛选培养基中不用加半乳糖；当需要目的蛋白表达时，需加入半乳糖代替葡萄糖作为碳源），以诱导目的基因的表达。
3、转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
4、同时转化2-3种质粒时可增加质粒的用量。
5、酵母为真核生物，不易长期保存，随感受态在-80℃保存时间的延长，转化效率会不断下降，建议保存时间不超过90天。
6、叠驰4742酵母菌株对高温敏感，适生长温度为27-30℃；高于31℃，生长速度和转化效率呈指数下降。
7、酵母在缺陷培养基中生长速度比驰笔顿础培养基慢，培养基中缺陷成分越多，生长越慢，以转化涂板为例：涂驰笔顿础平板29℃，48丑培养可见直径1尘尘克隆；涂厂顿单缺平板29℃，48-60丑培养可见直径1尘尘克隆，涂厂顿双缺平板29℃，60-80丑培养可见直径1尘尘克隆，涂厂顿叁缺或四缺平板平板29℃，80-90丑培养可见直径1尘尘克隆。
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