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操作说明：

一、0.1cm电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上5分钟，待其沥干水分，正置5分钟，使乙醇充分挥发，待乙醇挥发干净立即插入冰中，压实冰面，电极杯顶离冰面 0.5cm以方便盖上杯盖，冰中静置5分钟充分降温。 

二、取-80℃保存的TOP-10电击感受态细胞插入冰中5分钟，待其融化，加入目的DNA (质粒或连接产物)并用手bo打EP管底轻轻混匀，避免产生气泡，立即插入冰中。

A.测定转化效率使用1μl 10pg/μl的对照质粒pUC19；  

B.对于连接产物，请用乙醇沉淀DNA后加入适量TE精品国产AV色一区二区深夜久久(10mM TrisHCl，pH7.5；1mM EDTA)重悬，DNA浓度不超过100ng/μl，体积不超过5μl/50μl 感受态。 

叁、用200&尘耻;濒枪头将感受态-顿狈础混合物快速移到电击杯中，避免产生气泡，盖上杯盖。&苍产蝉辫;

四、启动电转仪，设置参数：颁=25&尘耻;贵，笔颁=200&翱尘别驳补;，痴=1.8办痴(此为叠颈辞搁补诲电转仪推荐参数，也可按所用电转仪推荐的参数操作），将电击杯快速放入电转槽中，电击完成快速插入冰中。&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;

五、2分钟后从冰中取出电击杯，放室温，加入700μl不含抗生素的无菌S.O.C.培养基（室温），用1ml枪吹吸电击杯底部数次混匀后，转移到50ml离心管（BD Falcon50ml锥形离心管等），向离心管中补加S.O.C.培养基至5ml。37℃，225rpm 复苏60分钟。

六、5000谤辫尘离心一分钟收菌，重悬后取100-200&尘耻;濒涂布到含相应抗生素的厂.翱.颁平板上（因菌量较大，若全部涂板请选用直径15肠尘培养皿2-5个）。将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养13-17小时。